基于环介导等温扩增技术的miR-21检测文献综述

 2023-02-07 16:59:42

【选题目的】MicroRNA (miRNA) 是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小RNA,其参与多种生理学和病理学过程,包括癌细胞的扩增、生长、分化、代谢和调控。

因此,miRNA不仅对于细胞生长、发育和分化有关的多种关键基因具有调控作用,并与包括癌症在内的多种人类疾病有关,也是现代分子生物学用于鉴定多种细胞功能、生物学和病理学过程的重要生物标志物之一。

环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA)的作用下,60-65℃恒温扩增,15-60 min左右即可实现109~1010倍的核酸扩增,该技术的优势除了高特异性、高灵敏度外,操作十分简单,对仪器设备要求低,临床使用不需要特殊的仪器,一台水浴锅或恒温箱就能实现反应,反应时间较短(30-60分钟左右),结果的检测也很简单。

本课题拟采用LAMP技术构建纸质传感平台用于核酸分子的检测。

【研究内容及手段】 建立以BstDNA聚合酶的环介导等温扩增技术并优化此技术,起初通过SYBR GreenⅠ荧光染料来检验引物的成功与否并且优化实验浓度,后期将其应用于试纸条,构建简单的可视化检测传感器。

研究过程中用到荧光分光光度计、LAMP以及试纸条。

【成果形式】荧光强度曲线图、凝胶电泳色谱图【工作进度】已设计完引物,并验证了其LAMP实验的可行性【文献综述】 微小核糖核酸(miRNAs)是一组非编码小核糖核酸,在大多数的动植物以及病毒中存在,它的存在对于基因表达过程十分重要。

1-3越来越多的研究表明,微小核糖核酸的异常表达水平与包括癌症在内的许多人类疾病的发生有着紧密的联系。

因此,微小核糖核酸被认为是癌症诊断和治疗的重要标志。

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