槲皮素通过抑制基质金属蛋白酶而改善术后疼痛文献综述

一、拟解决的问题： 术后疼痛为临床上常见的疼痛，是在手术后发生的急性疼痛。

及时对术后疼痛进行治疗对于患者的身心康复具有重大意义，但目前在临床上对术后疼痛所用的镇痛药没有令人满意的疗效。

发现新的安全有效的术后疼痛镇痛药在临床上具有重大意义。

本实验通过建立小鼠足底切口术后模型，采用Von Frey Hairs法检测模型机械痛阈，明胶酶谱法检测脊髓MMP-9/2水平, 观察并研究槲皮素对术后疼痛的镇痛作用。

二、研究手段：小鼠足底切口术后模型（plantar incision, PI）的建立：将小鼠随机分为7组：正常对照组；PI组；PI 槲皮素治疗组（20、40、80 mg/kg，ip）；PI 米诺环素组（50 mu;g/ 10 mu;l, it）；单独给予槲皮素组（80 mg/kg, ip）。

参照Brennan的足底急性切口疼痛模型的方法建立术后疼痛模型；小鼠腹腔注射4%水合氯醛（40 mg/kg）麻醉后，固定并消毒，用手术刀将小鼠左后爪掌面从足跟向趾部纵向切开，起点离后跟近端0.5 cm，切口长1 cm，深至皮下筋膜；提起皮下屈肌后纵向切开，切开后把屈肌移回原位，将切口用尼龙线缝合，手术结束后用10%的碘伏消毒切口和切口的周围；手术后的第2天检查伤口是否有被感染，并进行拆线。

Von Frey Hairs法检测模型的机械痛阈：将小鼠放入一个安静，温度为20 - 25℃的透明金属网格笼中；用20min的时间让小鼠适应实验环境，探觅行为停止之后开始测量；用足底测试仪的平钝针尖刺激大鼠足底，开始从无压力逐渐加压到动物缩足为止，每次测量的间隔为3 min，使小鼠足爪抬起的最小压力为其机械性刺激缩足反射阈值；每只小鼠至少要求平行测量4次并取其平均阈值，且要求计算其SEM值。

明胶酶谱法检测模型脊髓MMP-9/2水平：小鼠水合氯醛麻醉处死后取出脊髓(L1 - L6），将脊髓放入1%的 NP40裂解液中，剪碎后制成匀浆，提取其上清液；经明胶琼脂糖凝胶的提纯，加上样缓冲液后，涡旋混匀，在分离胶中加入1%明胶，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，并对分离胶进行洗脱、孵育，再用1%考马斯亮蓝染色，经脱色后，使用化学发光仪采集图像。

研究内容及方法：以下是研究内容及方法。