枸杞菟丝子多糖研究与性质鉴定文献综述

枸杞子和菟丝子都具有很高的营养和药用价值，枸杞和菟丝子中的多糖是它们主要的活性成分，在当前都具有重要的研究意义和广泛的应用范围。枸杞和菟丝子的药理功能主要是由其中的活性物质起作用，想要对其进行开发利用，则必须对其进行深入的研究分析。其中最重要的物质就是枸杞多糖。

经查阅资料，目前大家一般首先用大孔树脂来对枸杞多糖和菟丝子进行粗提取，并且一开始上柱的原液滤出液和水洗液滤出液会被放弃掉，并不在研究范围之内。后面得到的乙醇部位洗脱液才是研究的重点。通过思考和导师讨论并查阅资料，最终确立了以前两种洗脱液为研究重点，着重研究其中的活性物质的含量和性质。另外研究优化枸杞多糖的提取工艺来减少提取过程中枸杞原液的发酵提升提取质量。方法如下。

1新工艺多糖提取

取25g已经晒干脱水且外表完整无缺损的枸杞，以质量比1:1.2比例用纯化水用烧杯在室温下浸泡1h，接着置于打浆机以0，10min,20min,30min时间点间隔式打磨匀浆，每次打磨3秒钟，之后以枸杞质量30倍量即500ml纯化水用恒温85°C水浴浸泡1h,浸泡后取出放置于室温下静置冷却分层1h,分层后用200目滤袋折叠成8层进行过滤获得枸杞子滤液。滤液放在60°C水浴中加热做上柱前预热。预热完毕后，将其上柱到已经提前用纯化水泡过夜的JD-1型大孔树脂层析柱中，流速约每两秒一滴(具体以实际上柱时为准)且用500ml烧杯置于层析柱下接口，收集经树脂柱直接流下的滤液原液流出液A。待全部枸杞滤液通过大孔树脂柱，以纯化水淋洗(淋洗速度可以适当加快)直到流出液显无色或者浅色，并且以500ml烧杯收集枸杞子水洗液流出液B，并记录所用纯化水的体积。水洗脱完成后，取树脂体积2.5倍量，约220ml的70%乙醇溶液，加入树脂柱中开始洗脱，洗脱速度约每两秒一滴，尽量控制流速平稳匀速。当流出液颜色明显变深时开始使用500ml烧杯收集洗脱液；当70乙醇下降至树脂面以下10厘米时，加纯化水继续洗脱，至流出液乙醇浓度低于30%(此处可用酒精密度计测量)时停止收集洗脱液，最后可得乙醇洗脱液C。

2原工艺多糖提取

取25g已经晒干脱水且外表完整无缺损的枸杞，以质量比1:1.2比例用纯化水用烧杯在室温下浸泡6h，接着置于打浆机以0，15min,30min,45min,60min,75min,90min,105min,120min,

135min,150min时间点间隔式打磨匀浆，每次打磨3秒钟;之后以枸杞质量30倍量即500ml纯化水用恒温85°C水浴浸泡1h,浸泡后取出放置于室温下静置冷却分层2h,分层后用200目滤袋折叠成8层进行过滤获得枸杞子滤液。滤液放在60°C水浴中加热做上柱前预热。预热完毕后，将其上柱到已经提前用纯化水泡过夜的JD-1型大孔树脂层析柱中，流速约每两秒一滴(具体以实际上柱时为准)且用500ml烧杯置于层析柱下接口，收集经树脂柱直接流下的滤液原液流出液A1。待全部枸杞滤液通过大孔树脂柱，以纯化水淋洗(淋洗速度可以适当加快)直到流出液显无色或者浅色，并且以500ml烧杯收集枸杞子水洗液流出液B1，并记录所用纯化水的体积。水洗脱完成后，取树脂体积2.5倍量，约220ml的70%乙醇溶液，加入树脂柱中开始洗脱，洗脱速度约每两秒一滴，尽量控制流速平稳匀速。当流出液颜色明显变深时开始使用500ml烧杯收集洗脱液；当70乙醇下降至树脂面以下10厘米时，加纯化水继续洗脱，至流出液乙醇浓度低于30%(此处可用酒精密度计测量)时停止收集洗脱液，最后可得乙醇洗脱液C1。

3多糖检测

去无水葡萄糖标准品25mg，精密称量的置于250容量瓶中，加水适量溶解，稀释到刻度摇匀即可得标准品溶液。精密量取标准品溶液:空白0ml、对照品溶液0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml,1.0ml,分别置于25ml具塞试管中，分别加水补至2.0ml。接着各精密加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速精密加入硫酸5ml,摇匀，放置10分钟后放入40°C水浴保温15分钟，取出放入冰水浴中迅速冷却到室温后，参照《UV1900PC紫外–可见分光光度法标准操作程序》，在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。另取大孔树脂洗脱液A、B、C以及A1、B1、C1部分溶液，分别以0.45微孔滤膜滤过，精密量取0.5ml放入100ml容量瓶中，加纯化水定容至刻度，摇匀，精密量取1ml置具塞试管中，加水1.0ml,参照标准曲线的制备方法，一一加入5%苯酚和硫酸，并依法测定吸光度，从标准曲线上读出上述样品中葡萄糖的含量来测出和洗脱液流出液中枸杞多糖的含量。

4其它枸杞活性物质以及影响要素的检测