一.选题目的以及意义
癌症与免疫是当今生物与医药领域的热点研究对象,针对于癌症治疗领域,比起部分传统化疗药物,寻找选择性较强的抗癌药物则更受人关注。而在寻找合适的抑制剂之前,则需要做好肿瘤机制的基础研究,发现适合的靶点,进而合成筛选有效的治疗药物
铜离子在体内含量较低,但同时在许多维持细胞正常的生化反应中扮演了极其重要的角色。一方面铜离子作为部分生化反应中关键酶的辅助因子,调节细胞正常的功能且维持稳态。另一方面,作为重金属离子,对于生物体有着潜在的毒性作用。
A蛋白是细胞内的铜离子转运体之一,维持细胞结构内外离子浓度平衡中起到了关键作用,支持细胞内生化反应,并降低铜离子物质蓄积所造成的毒性作用。
C蛋白也是金属离子转运体,同时和癌症与免疫息息相关,C蛋白的高表达可以显著降低癌细胞的增殖和转移能力
在肿瘤患者体内血清和肿瘤组织中,铜离子浓度显著提升,揭示了铜离子水平和肿瘤的发生可能有较大联系
铜离子可以促进血管生成因子的表达,肿瘤组织往往血管丰富,铜离子浓度升高可以促进肿瘤组织的血管生成
铜伴侣蛋白和铜离子分泌在不同癌细胞中表达量有显著差异:在乳腺癌,直肠癌,子宫癌,肝癌中高表达,而在胆管癌和胰腺癌中分泌较少
有相关实验利用金属离子螯合剂,如EDTA,四硫钼酸盐TTM等,对细胞及周围环境中的铜离子进行螯合,降低局部铜离子浓度以减少肿瘤细胞附近的血管生成,抑制其对肿瘤细胞的供应。但是此类金属离子螯合剂往往选择性较差,容易造成金属离子的蓄积毒性。而通过合成铜离子结合蛋白的抑制剂,特异性的结合铜伴侣蛋白,阻断下游通路,从而阻断铜离子在癌细胞内的转运。因铜离子在肿瘤细胞内浓度远高于铜离子在正常细胞内的浓度,故合成铜伴侣蛋白抑制剂可以有效地解决药物的靶向性。因此研究铜伴侣蛋白机制对于发现潜在癌细胞靶点有较大价值
常用的检测蛋白质之间相互作用的方法有:酵母双杂交,荧光共定位,荧光双分子互补,FRET,免疫共沉淀,亲和纯化质谱
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