志贺氏菌效应蛋白的表达与其效应研究文献综述

志贺氏菌效应蛋白的表达与其效应研究

一、课题解决的问题

此次课题研究的目的是在大肠杆菌中表达与纯化志贺氏菌感染上皮细胞时所编码的相关的效应蛋白，并初步研究它们的功能。对志贺氏菌的感染时产生的效应蛋白的研究，不仅有利于我们更清楚地了解其传播及感染途径，为阻断其传播提供依据，也能为建立更加有效的免疫系统提供理论与技术支持，为人类的健康事业做出贡献。

二、研究方法和技术路线

此次课题研究采主要依靠实验法来进行研究。实验法是最主要的方法。查找文献也是必不可少的。因为文献中可能有前人的研究成果对此次研究有帮助。通过文献来弥补研究上的理论知识的不足，为研究的完成提供有力的理论储备。

本次研究的目的是在大肠杆菌中表达与纯化志贺氏菌感染上皮细胞时所编码的相关的效应蛋白，并初步研究它们的功能，研究对象是志贺氏菌分泌的相关效应蛋白，研究手段是实验法，包括引物的设计，PCR的应用，效应蛋白基因的诱导与表达以及纯化等等。志贺氏菌是一种革兰氏阴性致病菌，我们应用的是体外诱导表达效应蛋白的方法。我们把其效应蛋白基因导入大肠杆菌中，因为大肠杆菌也是一种革兰氏阴性菌。虽然表达出来的蛋白可能与志贺氏菌表达出来的蛋白有些不同，但因为它们都是革兰氏阴性菌，所以应该差别不大。而且，大肠杆菌比志贺氏菌繁殖快，适应力强，更加适合作为实验材料。当然，找到合适的引物来扩增效应蛋白的基因序列也是很重要的。这次实验的引物是根据相关蛋白的序列自己设计的。

实验步骤：

1.查找文献，了解国内外的研究方向与成果，确定自己的课题，撰写开题报告；

2.碱裂解法提取志贺氏菌的目的基因后，加入合适的引物（自己设计的）用PCR扩增；