透明质酸修饰的脂质体纳米颗粒用于天然环肽的结肠癌靶向递送文献综述

一、实验背景

RA-XII是从中药云南茜草中分离的天然六元环肽，具有抗癌和抗炎活性[1]。已有实验表明，云南茜草天然环肽RA-XII通过AMPK/mTOR/p70S6K途径和PI3K/AKT/NF-kB途径抑制肿瘤生长和转移[2]。同时，RA-XII抑制肿瘤细胞对胶原、纤连蛋白和层粘连蛋白的黏附，降低了血管细胞黏附分子、细胞内黏附分子和整合素、整合素结合的表达，通过干扰切丝蛋白信号和趋化因子受体，显著抑制肿瘤细胞的迁移[3]。在人结肠癌细胞HCT116中亦可通过b-catenin和b-catenin依赖蛋白CD44和MMP7的表达，从而降低细胞的运动能力；通过降低SREBP-1的表达，抑制新生脂肪酸蛋白FASN和SCD的表达，有效降低脂肪酸水平，最终抑制结肠癌的生长和转移[4]。

由于癌细胞表面过度表达受体CD44，而透明质酸（HA）可与其结合并在肿瘤部位有更高水平的转化率[5]。同时作为结缔组织主要胞外成分，HA会被透明质酸酶（Hyal）降解为低分子碎片，受体介导的HA内化后被细胞表面的Hyal-2切割成长达50个糖单位，形成小窝，小窝变成内小体并最终与溶酶体融合并被肿瘤组织中的Hyal-1进一步分解为四糖[6][7]。据此降解途径，HA可以选择性运输药物至细胞内室的载体。已有实验表明，HA脂质体的细胞靶向效率强烈依赖于HA分子量、接枝密度和细胞表面受体CD44密度：CD44受体密度与HA脂质体摄取量正相关、超过HA配体接枝密度有一个最低阈值（约0.5-5），超过这个阈值后，通过CD44受体有效摄取HA脂质体[8]。有实验指出CD44在大肠癌中mRNA转录水平和细胞膜上蛋白表达水平及在肿瘤细胞基质的蛋白表达水平高于远癌切端正常组织[9],具有良好的靶向条件。

由于RA-XII制剂研发受水溶性和毒性限制,针对此问题前期已初步证实RA-XII可高效负载到纳米载体，并靶向输送到肿瘤细胞内。本课题以脂质体纳米颗粒为药物载体，将环肽RA-XII负载到脂质体中，并用透明质酸对脂质体表面进行修饰，改善其治疗效果，从而实现对环肽的结肠癌靶向递送。

二、实验方法

1.制备RA-XII的透明质酸脂质体纳米粒

2.测定纳米粒形貌特征、药物包封率、长期稳定性等

3.细胞内共定位实验、细胞毒性实验、细胞选择性实验

三、实验内容

（1）制备纳米粒