麦冬皂苷结合蛋白抑制剂对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的作用研究文献综述

 2023-01-29 21:19:41

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

拟研究或解决的问题:

本课题拟在前期研究基础上,初步确定麦冬皂苷结合蛋白抑制剂(blebbistatin)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤小鼠的作用,为从在急性肺损伤模型上探讨麦冬结合蛋白的作用机制提供参考。

采用的研究手段:

(1)LPS诱导小鼠肺损伤模型的制备

将动物随机分为4组,每组包括8-10只小鼠。尾静脉注射LPS(30mg/kg)诱导小鼠急性肺损伤,以无菌生理盐水作为空白对照组,麦冬皂苷结合蛋白抑制剂给药组,模型及模型给药组,造模前1小时给药,药物剂量的选择基于预实验的结果。

(2)肺干湿比的测定

在LPS诱导肺损伤6小时后,将小鼠处死,游离左肺测定肺湿重,并将肺组织放在60C的烘箱24小时得到肺干重,计算干湿比衡量肺组织水肿程度。

(3)肺部MPO的测定

取肺部组织样本与0.9%生理盐水匀浆,匀浆后的混合物2000转离心10分钟,取上清,并在测量前保存在70C。肺匀浆中MPO活性通过MPO活性试剂盒测定。样本的蛋白含量通过BCA测定,最终的结果是每毫克蛋白中MPO的单位数。

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