用于T细胞转染的阳离子脂质的设计与合成文献综述

一、研究背景嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T）是指经嵌合抗原受体修饰的T细胞，可以特异性识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性均较常规应用的免疫细胞高，从而发挥抗癌作用。

2017年，诺华和吉利德公司两款CD19 CAR-T，Kymriah和Yescarta分别获得FDA批准上市，用于治疗复发性或难治性的急性B系淋巴细胞白血病。

标准的CAR-T治疗流程包括：（1）从病人自身外周血液中分离T细胞并纯化；（2）利用基因工程技术转染T细胞，制备CAR-T细胞；（3）扩增CAR-T细胞；（4）将CAR-T细胞回输至病人体内。

而T细胞转染是CAR-T的限速步骤，主要是因为（1）核酸分子无法有效穿透细胞结构中的诸多生物膜屏障（如细胞膜、内涵体/溶酶体膜、核膜等），致使其不能被细胞摄取，无法到达靶细胞器；（2）胞吞进入细胞的核酸分子被内涵体/溶酶体捕获，在溶酶体内的酸性环境和水解酶作用下被快速降解。

因此，为了使核酸分子在靶细胞中安全、高效、可控地表达，必须采用安全有效的载体递送。

目前研究最多的转染方法主要包含三种：以逆转录病毒和腺病毒为主的病毒载体，以电转染为主的物理方法，以及以脂质体和聚合物为主的非病毒载体。

1. 病毒载体截至2018年6月，临床试验中超过70%的基因载体为病毒，包括逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等[2]，优点是转染率高，可以持续稳定地表达基因。

缺点是存在严重的免疫原性，具有突变风险，且生产成本高，可装载的基因尺寸小，缺乏靶向性，因而无法应用于体内转染。

慢病毒作为最常使用的转染载体，其结构和基因组复杂程度远超其他逆转录病毒，因而具有独特的整合机制和病毒感染持久性。