开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
课题来源:自拟课题
课题依据:
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)属浆细胞恶性肿瘤.是中老年人群最常见的血液系统恶性肿瘤之一。由于骨髓瘤细胞增殖比例低和多药耐药形成比例高,大多数患者在缓解后短期内复发,迄今仍被视为不可治愈的疾病。多发性骨髓瘤的发生发展与骨髓瘤细胞的异常增殖和微环境血管生成密切相关。VEGF是目前发现作用最强,特异性最高的促血管生成因子。因此,研究通过对VEGF传导通路阻断的药物机制,达到缓解和治疗多发性骨髓瘤的效果,会有较好的发展前景。
中药或中药提取物一般具有高活性、低毒性的特点,是当代抗肿瘤药物研究的热点。黄芩,始载于《神农本草经》,归草部山草类,列为中品,为唇形科多年生植物黄芩的干燥根,药性苦寒,有清热燥湿、泻火解毒之效。黄芩的主要有效成分为黄酮类化合物,汉黄芩素即为黄芩特征性的化学成分之一。研究证实,汉黄芩素具有抗炎、抗肿瘤等广泛的治疗作用,不仅能体外抑制血管新生,同时还能抑制胃癌、乳腺癌等实体肿瘤裸鼠移植模型组织中的血管新生,并有效抑制肿瘤的生长。
主要解决的问题:
本课题探讨汉黄芩素是否可以通过抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226表达和分泌VEGF,抑制骨髓瘤微环境中的血管新生作用。拟通过血管生成的药效学实验及Western blot等实验来探究汉黄芩素对RPMI8226细胞血管生成作用的影响。
1.酶联免疫法实验(ELISA)
将骨髓瘤细胞RPMI8226在常氧和缺氧的条件下分瓶给药处理,给药浓度分别为0、20、40、80mu;M。然后将培养基更换为无血清培养基。12小时后,用酶联免疫法检测各组细胞上清液中VEGF的含量。
2.划痕实验
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