开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
课题背景
1.1 乙肝病毒及其X蛋白
目前，全世界约有4亿人感染乙肝病毒（Heptatis B virus）。研究表明，乙肝病毒的感染与肝炎、肝硬化和肝癌的发生密切相关。乙肝病毒属于逆转录病毒，基因组全长3.2kb,为部分双链环状DNA（rcDNA）。当病毒进入肝细胞后，其rcDNA 转变为共价闭合环状双链DNA（cccDNA），并以此为模板生成四种病毒蛋白，分别为核心蛋白（C）、聚合酶（P）、表面蛋白（S）和X蛋白。研究发现，X蛋白对乙肝病毒的复制和肝癌的发生发展至关重要。X蛋白是一种转录辅激活子，主要存在于宿主细胞质中，少量存在于细胞核内。X蛋白不能直接与宿主细胞DNA 结合，而是通过激活多种信号通路或者与核内DNA结合蛋白相结合，改变多个基因的表达，从而促进病毒的复制和肝癌细胞的恶化 。
1.2 X蛋白结合蛋白HBXIP
乙肝病毒X蛋白结合蛋白（hepatitis B X-interacting protein, HBXIP）基因是由Melegari等于1998 年首先从HepG2细胞中克隆获得，编码173个氨基酸，分子量约为18kDa ，可与乙肝病毒X蛋白的羧基端特异性结合。本实验室前期研究发现HBXIP在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用，能够调控中心体的复制，抑制细胞凋亡 ，并且作为一种转录辅激活子，能够通过特定的机制被运输进入细胞核内，同核内的转录因子相结合，显著促进乳腺癌和肝癌细胞的增殖能力。
研究目的
本论文以稳定表达HBV基因组、产生完整病毒颗粒的肝癌细胞系HepG2.215、HepAD38为研究对象，通过构建HBXIP重组质粒和合成HBXIP干扰，转染含有乙肝病毒的肝癌细胞，检测HBXIP对细胞中HBV复制中间体cccDNA的影响，以及在mRNA水平对 HBV、HBx、HBs、HBc表达的影响，同时检测过表达和干扰HBXIP对细胞中分泌的乙肝病毒、表面抗原和e抗原的影响，从而初步探究HBXIP对乙肝病毒复制影响的机制。
实验流程:
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