治疗用单克隆抗体的早期筛选方法建立文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一、拟解决的问题：

自上世纪70年代以来，随着生物工程的兴起，生物技术药物开始进入人类的视野。随着科学技术的不断发展，愈来愈多的生物药开始进入市场并投入使用，生物药的市场占比也逐年增加，研究生物药的机构和企业如雨后春笋般络绎不绝。其中，目前正在研究的生物药有1/4是单克隆抗体类药物，治疗性抗体已成为生物制药业发展最快的领域之一。它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等。而单克隆抗体类药物最开始源于杂交瘤技术的建立。

1975 年, Kohler 和Milstein 首先建立了杂交瘤技术。这种技术通过体外持续培养骨髓瘤细胞，融合可分泌抗体的B 淋巴细胞， 再经次黄嘌呤氨基蝶呤胸苷筛选及克隆化得到大量单克隆细胞株。正是这一技术为治疗性单克隆抗体的发展奠定了基础。由于通过单克隆细胞株得到的抗体是高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，且具有特异性高、毒性低的特点，在临床中具有非常重要的应用价值，因而使得单克隆抗体药物成为当下研究以及生产的宠儿之一。企业研发单克隆抗体药物的脚步也越来越快。仅2017年上半年，经FDA批准上市的治疗用单抗药物就有70多个。

随着单克隆抗体药物在市场上的占比逐年增长，研发机构的增长，企业如何在研究和生产单克隆抗体药物时建立完整、有效率的纯化以及筛选系统，以节约时间和成本，提高研发和生产效率也成为目前热议的话题之一。

本课题拟通过建立相关的杂交瘤细胞株生产相关单克隆抗体，通过纯化得到单克隆抗体之后，通过酶联免疫吸附测定（Elisa）、流式细胞分析（FACS）等方法，建立一套严谨的单克隆抗体亲和力早期筛选系统，并探究其对单克隆抗体药物的早期研发所具有的重要的实用价值。

二、采用的研究手段

本课题拟构建杂交瘤细胞株，并通过培养该细胞株生产目的单克隆抗体，再经纯化后，对所得单克隆抗体进行亲和力相关方面的筛选，并对筛选系统进行简化和优化，以节约时间和成本。

一、抗体表达

将挑选出来的杂交瘤细胞小量培养，收集细胞上清。