利用CRISR-Cas9基因编辑技术建立抗病毒蛋白PKR基因敲除细胞系文献综述

抗病毒蛋白PKR作为先天免疫系统的重要组成部分，在宿主抵抗病毒感染方面发挥着至关重要的作用。

近年来，CRISPR-Cas9基因编辑技术以其高效、便捷等优势，为构建PKR基因敲除细胞系提供了新的研究思路。

本综述首先介绍了CRISPR-Cas9技术和PKR蛋白的基本概念，然后概述了PKR基因敲除细胞系的构建方法和研究现状，并重点阐述了其在病毒与宿主相互作用研究中的应用，最后对该领域的未来发展趋势进行了展望。

关键词：CRISPR-Cas9；PKR；基因敲除；抗病毒免疫；病毒-宿主相互作用

1.1CRISPR-Cas9基因编辑技术CRISPR-Cas9系统最初是在细菌中发现的适应性免疫系统，用于抵御外源遗传物质的入侵。

CRISPR（ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats，成簇的规律间隔的短回文重复序列）指的是细菌基因组中的一段特殊DNA序列，包含了一系列重复序列和间隔序列。

Cas9(CRISPRassociatedprotein9)是一种核酸内切酶，能够在向导RNA(guideRNA,gRNA)的引导下，识别并切割靶向DNA序列。

CRISPR-Cas9技术通过人工设计gRNA序列，可以实现对基因组中特定DNA序列的精准编辑，包括基因敲除、基因插入和基因替换等。

1.2抗病毒蛋白PKR蛋白激酶R(ProteinkinaseR,PKR)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，广泛存在于哺乳动物细胞中，是宿主先天免疫系统的重要组成部分。

PKR能够被病毒RNA等病原相关分子模式（PAMPs）激活，进而磷酸化真核细胞翻译起始因子eIF2α，抑制病毒蛋白的合成，从而发挥抗病毒作用。