开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 课题的研究背景、意义和目的
多克隆抗体的定义
传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经不同途径免疫动物，由于抗原性物质具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌抗各种决定簇的抗体，故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物，所以称这种免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体(polyclonal antibody，PcAb)。多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高。多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为制备高效价和高特异性的多克隆抗体，必须要有理想的免疫原、适宜的动物及切实可行的免疫方法。本次实验主要介绍多克隆抗体的制备及相关技术。
多克隆抗体的优点
多克隆抗体能识别任一抗原上的多个表位，而单克隆抗体仅检测任一抗原上的一个表位。多克隆抗体可有助于放大低表达水平的靶蛋白信号，因为靶蛋白可在多个表位上结合不 止一个抗体分子。但是这会给定量实验造成不利影响，因为结果将变得不准确。由于能识别多个表位，多克隆抗体可在 IP/ChIP 中得到更好的结果。比单克隆抗体更能容许抗原中的微小变化。它们会识别出与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白质，或者从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白，例如当未测试物种中的抗原性质未知时，有时会使用多克隆抗体。这也 使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的首选。多表位通常可提供更为有力的检测。多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常可识别多个结构域。
磷酸化多克隆抗体产生的意义
蛋白质磷酸化和去磷酸化的调节在细胞信号转导过程中起重要的作用，与细胞生命活动的调控密不可分。要识别蛋白质是否被磷酸化，磷酸化抗体应运而生。但是以磷酸化的蛋白质或去磷酸化的蛋白质为抗原获得抗体，难度和成本都相当高。目前，合成出相应的磷酸化多肽作为抗原，用来制备磷酸化抗体，成本相对低廉，周期也较短，可满足大多数科研和检测的需要。
磷酸化多克隆抗体的前景
对于信号转导科研来说，抗酪氨酸磷酸化抗体的出现是一个意义重大的事件。在没有抗酪氨酸磷酸化抗体之前，蛋白质和酶的酪氨酸磷酸化只能通过非常危险的并且很费时的放射性实验来检测。而利用抗酪氨酸磷酸化抗体，则可以通过Western Blot或其它免疫学方法轻松地检测到磷酸化信号。常规的检测方法包括：用抗酪氨酸磷酸化抗体在Western Blot上检测内源或外源表达的磷酸化蛋白。如果目标蛋白的含量较低，也可利用免疫沉淀的方法先富集发生磷酸化的酪氨酸蛋白，再检测目标蛋白的水平。抗酪氨酸磷酸化抗体也常用于检测在不同处理的条件下，细胞内总的酪氨酸磷酸化水平的变化情况，作为许多细胞生物现象的一个重要指标。
磷酸化多克隆抗体的研究目的
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