原核表达系统中蛋白质的提取与纯化文献综述

一、 研究背景和目的利用外源蛋白表达系统生产具有重要价值的药用蛋白是现代生物技术产业的核心内容和研究热点，也是各国政府和制药企业竞相巨额资助的研究领域之一。

目前常用的一些外源表达系统包括原核表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统、哺乳动物细胞表达系统和植物表达系统等。

原核表达系统因其表达周期短、表达量大、操作简单、容易培养和进行基因改造、大规模培养较低等优势，成为目前主要使用的外源蛋白表达系统。

大肠杆菌表达系统是技术最成熟的表达系统。

但是在大肠杆菌表达系统中，外源蛋白常因过量表达而以包涵体的形式存在，需要复性、在高密度培养过程中乙酸积累造成的细胞毒性、外源蛋白经常与内毒素相伴表达、内毒素和热源物质等杂质成分等缺陷迄今尚未完全克服。

本项目旨在针对大肠杆菌表达系统中的外源蛋白进行分离纯化方法的研究，以获得具有生物活性的目的蛋白产品。

二、目的蛋白的存在形式1、融合蛋白这种方式将目的蛋白与某些易于高效表达和纯化的融合头相连，即将目的蛋白表达为融合蛋白的一部分。

融合蛋白表达可以获得目的基因的高效表达并减少蛋白酶的降解，并能够提供特异、简单的纯化方法。

通过化学处理或者蛋白酶水解即可切除融合头获得目的蛋白。

2、非融合蛋白目的蛋白表达不含任何原核多肽序列，而是将非融合蛋白的操纵子改建成细菌的启动子。