基于亚铁螯合力的灰树花蛋白酶解工艺优化文献综述

一、研究内容

灰树花作为食药两用菌之一，富含有多种的人体必需的营养物质，具有显著的抗肿瘤，增强免疫和抗氧化活性。但目前的研究多针对于灰树花多糖，对于其蛋白质的研究较少，相关研究表明其蛋白质也有一定的生物活性。本研究将从六种蛋白酶中筛选出酶解灰树花蛋白的最佳用酶，在此基础上，以亚铁螯合能力为响应值，以pH、酶底比、温度、底物浓度和酶解时间五种单因素和正交实验对灰树花蛋白进行酶解工艺的优化，并且进行抗氧化活性的测定。

二、文献综述

灰树花是一种大型的食药两用真菌，其子实体干品富含蛋白质(31.5%)、碳水化合物(49.69%)、粗纤维(10.7%)，以及少量的脂肪、维生素和无机微量元素等营养成份，并具有抗肿瘤，增强免疫和抗氧化活性^[1]。灰树花多糖被广泛的研究，其副产物蛋白质同样具有一定的生物活性，例如Tsao等^[2]从灰树花子实体中分离出的一种83KD的蛋白具有很好的免疫活性，灰树花的一个具有ACE抑制活性的小肽能够抗高压^[3]。

多肽在自然界中广泛存在，其生物活性多肽具有免疫调节，激素调节，酶调节，抗病毒，抗氧化，降血压和降血脂等功能，使用安全^[4]。多肽的各种活性日益被研究者发掘，例如Hua等^[5]发现大豆蛋白能够加速葡萄糖吸收，并且治疗由胰腺引起Ⅱ型糖尿病。龚吉军^[6]通过对油茶粕蛋白的提取、油茶粕多肽的制备及其生物活性进行了深入的研究，成功制备出具有良好抗氧化、降血压、增强机体免疫力、降血脂和抗菌活性的油茶粕多肽。朱艳华^[7]用玉米蛋白粉为原料制备抗氧化多肽，采用柱层析方法玉米多肽进行纯化，并对其理化性质、抗氧化、抗肿瘤活性进行研究，结果表明玉米多肽可以通过提高机体免疫力来实现抗肿瘤效果。

根据多肽的生物活性又可将多肽分为抗菌肽，抗氧化肽，降血压肽等，属于天然抗氧化剂的抗氧化多肽具有来源广泛、易吸收、活性强的特点，能有效清除活性氧，减缓氧化损伤，预防和缓解多种慢性疾病。其抗氧化机理包括:给抗氧化酶提供氢、缓冲生理pH值、鳌合金属离子和捕捉自由基等^[8]。武萌萌^[9]通过对螺旋藻多肽进行体外抗氧化评价机制，发现其比BHT、抗坏血酸等合成抗氧化剂具有更有效的自由基清除能力。刘立品^[10]的研究发现高浓度多肽液的清除羟自由基能力与Vc接近,而对铁离子的螯合能力优于Vc。

除生物体内天然存在的抗氧化多肽，抗氧化肽的来源大多是通过蛋白降解。主要以植物性蛋白和动物性蛋白为原料，通过酶解法获取。常用的酶通常为消化酶或是从植物、微生物中提取的酶，主要有胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、糜蛋白酶等^[11]。