拟解决问题:本课题拟从尖吻蝮蛇蛇毒中提取蛋白质C激活物,蛋白质C激活物在医学上作为蛋白质C活性测定的诊断试剂,在自发性深静脉血栓(DVT)、家族性易栓症等抗凝系统障碍疾病以及脑血栓、心肌梗死等心血管疾病的前瞻性诊断领域发挥重要作用。
但目前我国市场上商品化的蛋白质C激活物只有进口的Protac试剂,其价格昂贵,限制了此诊断试剂在国内的应用。
且由于新冠疫情的影响,试剂进口受到影响。
本课题拟从我国分布广泛的蝮蛇尖吻蝮蛇的蛇毒中提取蛋白质C激活物并对其性质进行初步探讨,为后续深入研究及国内商品化生产打下基础。
拟采取的研究手段:基于国内外学者对蝮蛇蛇毒中蛋白质C激活物的研究,本课题拟采用以生物活性为导向的色谱纯化方法,使用离子交换层析及分子筛凝胶层析进行蛋白质C激活物的提纯,然后对提取物从分子量、部分凝血活酶时间(aPTT)、功能活性(生色底物法)及蛋白含量等水平进行表征;并进行二级质谱分析用于蛋白家族的归类研究。
文献综述: 血液中的蛋白质C抗凝系统是血液抗凝系统的重要组成部分,该系统包括凝血酶,血栓调节蛋白,内皮细胞蛋白质C受体,蛋白质C,蛋白质S。
凝血酶与血栓调节蛋白在内皮细胞表面形成复合物,并进行蛋白质C的活化,随后蛋白质C从内皮细胞表面脱落,与蛋白质S结合进行已活化的凝血因子Ⅴa和Ⅷa的灭活,产生抗凝血作用[1]。
在医学上,蛋白质C系统的功能缺陷常导致人体抗凝系统的功能严重缺乏[2]。
活化蛋白质C抵抗(Activated Protein C resistance)可由先天性凝血因子V基因缺陷或自身免疫引起,结果都为凝血因子V无法灭活,导致严重的易栓症。
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