一、课题目的本课题拟完成TCRbeta;链蛋白的表达。
利用alpha;beta;CD8 T细胞cDNA文库,获取TCRbeta;链基因片段,克隆至原核生物表达载体pET26,转化工程菌E.coli BL21(DE3)作为宿主细胞,通过IPTG诱导的方法诱导蛋白表达,表达后的产物利用SDS-PAGE电泳检测。
二、主要研究内容1. TCRbeta;链基因的获取。
2.TCRbeta;链表达系统的建立。
3.TCRbeta;链蛋白的诱导表达。
三、文献综述T淋巴细胞是淋巴细胞中数量最多、功能最复杂的一类,它由骨髓中的淋巴样干细胞迁移进入骨髓,在胸腺中分化成熟,经阳性选择和阴性选择获得主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)限制性和自身耐受性。
T细胞主要负责体液免疫,并辅助细胞免疫,调节免疫应答,这依赖于T细胞表面抗原受体(T cell receptor, TCR)的作用。
在过继免疫治疗中,经改造的TCR可以靶向不同类型的肿瘤相关抗原,对TCR结构的修改还可以提高TCR-T的安全性,此外,TCR四聚体技术还为细胞免疫检测提供新的方法和手段[1-3]。
TCRbeta;链蛋白的表达与纯化可为研究TCR与MHC结合空间结构的工作提供基础。
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