开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
研究的问题:
在2017中国化学会第十届全国化学生物学学术会议上有专家指出从20 世纪70 年代以来至今,乳腺癌发病率一直保持上升的趋势,是全球范围内女性最常见的恶性肿瘤之一。乳腺癌目前已经成为当今社会的重大公共卫生问题之一。目前用于乳腺癌的一线药物主要是生物制品,如赫赛汀,多柔比星,曲妥珠单抗等。但是此类药物成本高,价格昂贵,对于大多数人而言负担较大,难以承受,并且乳腺癌治愈后复发的风险也一直存在。2003年AL-Haj等人从乳腺癌组织中分离得到乳腺癌干细胞(BCSCs),发现这类细胞具有自我更新、多向分化的特点和强大的体内致瘤性,是肿瘤发生、发展和转移的根本原因,也是肿瘤复发的主要原因。经赵洋,邹娟,等人研究发现吡喃酮类化合物具有明显的药理活性可以对BCSCs造成抑制。针对这一现象本课题旨在研究一类吡喃酮吩嗪类化合物是否可以在体外抑制BCSCs的干性,发现更多的潜在药物与潜在靶点,给患者提供更多的选择。
研究内容:
1.研究检测化合物对BCSCs活性的影响
培养乳腺癌细胞(MCF-7,MDA-MB-231),取对数生长期的癌细胞用无血清培养基悬浮培养富集BCSCs,获得一定数量的BCSCs,获得的干细胞需要进行干细胞验证才进行下一步实验,先初步确定吡喃酮吩嗪类化合物LD50,用不同浓度的吡喃酮吩嗪类化合物培养BcsCs,这些浓度小于等于LD50,建立对照。用MTT法检测BcsCs细胞活力
2研究吡喃酮吩嗪类化合物对干性标记物的影响
用不同浓度的化合物处理乳腺癌细胞(MCF-7,MDA-MB-231),富集用吡喃酮吩嗪类化合物培养后的细胞,通过Western blot检测这类化合物对干性标记物(ALDH1,OCT3/4,SOX2,Nanog)是否存在抑制作用
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