开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、目的
锌离子受体GPR39在人体中枢与外周神经系统广泛表达,参与锌离子的转运调控,具有重要的神经生理功能。然而,目前为止,尚未发现高专一性分子探针,这大大限制了GPR39受体功能的研究。本课题预期建立GPR39-HEK293 稳定表达细胞系,为发现GPR39受体高专一性分子探针提供前期研究的基础。
二、文献综述
1、背景
1997 年 McKee 教授等第一次从人类胎儿大脑cDNA中克隆出GPR39和GPR38。最初的报告显示这些新型的G蛋白偶联受体与饥饿素(Ghrelin)和神经降压素(Neurotensin)受体有关[1]。GPR39与ghrelin受体GHS-R来源于同一家族,由462个氨基酸残基构成,具有7个跨膜域。GPR39是与G蛋白偶联的受体,通过Gq、G12/13、PI3K和RhoA介导产生信号途径;定位于人 2 号染色体。在人的空肠、回肠、十二指肠、胃、肝脏、脂肪组织、视网膜色素上皮细胞及垂体中高度表达,对这些功能器官有着重要的调控作用[2]。
HEK293细胞,又叫人胚胎肾细胞293,是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系,具有转染效率高,易于培养等特点。其中,293A细胞是用来包腺病毒,293T细胞是用来包慢病毒。293细胞比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T/17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。
建立GPR39-HEK293稳定表达细胞系旨在为发现GPR39受体高专一性分子探针提供前期研究基础。
2、研究手段
运用脂质体转染法通过脂质体转染试剂2000将GPR39基因转染到HEK293细胞中[3]。
课题毕业论文、文献综述、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。