)一、拟研究或解决的问题对菊芋地上部分的化学成分进行研究,将其未能确定化学结构的化合物进行分离纯化,并鉴定其结构,进而从菊芋中得到一些首次分离出的化合物,进一步阐明了菊芋的化学成分。
二、研究手段本实验以陕西省镇坪县的菊芋地上部分,包括茎、叶、花瓣、花盘,作为研究对象。
通过结合液质联用技术、大孔树脂柱色谱、薄层色谱、反相硅胶柱色谱和核磁共振等手段,对菊芋地上部分的化学成分进行分离纯化和化学结构鉴定。
1 运用HPLC-MS液质联用技术鉴定质谱图中的主要质谱峰。
1.1 HPLC-MS供试品溶液制备 分别取适量菊芋的茎、叶、花瓣、花盘,用高速粉碎机粉碎,过60目筛。
分别精密称取0.5g粉末,各加入70%乙醇20mL,超声提取30min,滤过,滤液用0.45mu;m微孔滤膜滤过,所得滤液作为HPLC-MS的供试液。
1.2 HPLC-MS方法的摸索及完善查阅菊芋的相关文献,对柱温、流动相、洗脱梯度等HPLC-MS条件进行摸索和完善,得到最终的HPLC-MS条件。
1.3 运用HPLC-MS液质联用技术,结合相关文献,解释所得到的主要质谱峰。
对于尚不能确定化学结构的质谱峰,进行后续的实验步骤。
2 菊芋地上部分化学成分的分离纯化2.1 供试品溶液的制备称取菊芋地上部分500g,粉碎,过20目筛,加入70%乙醇3L,80℃水浴加热回流提取两次,每次30min,滤过,合并滤液,滤液于50℃减压浓缩成浸膏,并定容至200mL。
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