重组蛋白A工程菌的检定及高密度发酵的研究文献综述

选题依据及意义基因重组蛋白质药物是指利用DNA重组技术生产的蛋白质药物。

大部分重组蛋白药物是人体蛋白或其突变体，主要作用机理为弥补某些体内功能蛋白的缺陷或增加人体内蛋白功能。

重组蛋白生产过程包括：鉴定具有药物作用活性的目的蛋白，分离或合成编码该蛋白的基因，然后将其插入合适的载体，转入宿主细胞，构建能高效表达蛋白的菌种库或细胞库，最后扩大规模应用到发酵罐或生物反应器进行大量的目的蛋白药物生产。

《中国药典》第三部规定：生物制品生产用菌毒种应采用种子批系统。

为实现大规模生产重组蛋白，菌种库的构建非常关键。

随着基因工程的发展和应用，构建基因工程菌已经成为提高目标蛋白表达水平的一项基本手段。

基因工程菌的过量表达目标产物还有助于简化后续的分离纯化操作。

实验室小罐规模的高密度发酵可以为车间中试放大提供必要的参数，故高密度发酵是重组蛋白生产过程中的关键步骤。

研究的主要内容 重组蛋白A的菌种库建立⑴、原始种子、主种子、工作种子的构建；⑵、原始种子、主种子、工作种子的检定:对原始种子、主种子、工作种子进行革兰染色、电镜、抗生素抗性、遗传稳定性、质粒拷贝数、生化反应等检定； 高密度发酵　　　　　⑴、高密度发酵的前期准备阶段；⑵、高密度发酵的菌体生长过程控制；⑶、高密度发酵的诱导表达阶段控制； 研究的主要方法和手段 实验法通过无菌操作、菌种培养、生化检定等实验方法完成菌种库的构建；通过对发酵过程的控制、各种发酵参数的修改等实验完成高密度发酵。