开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 拟研究或解决的问题
单酰基甘油脂肪酶(monoacylglycerol lipase,MAGL)是内源性大麻素系统的一个重要组成部分,主要通过代谢内源性大麻素 2- 花生四烯酸甘油酯(2-arachidonoylglycerol,
2-AG)起到调节内源性大麻素系统的作用 [1]。近来研究发现,MAGL 是一个治疗疼痛 [2]、阿尔茨海默病(Alzheimerrsquo;s disease,AD)[3]和肿瘤 [4]的潜在新靶点。而研发 MAGL 抑制剂将为治疗相关疾病带来新契机 [5]。
而本实验将利用酵母表面展示技术,将导入的单酰甘油脂肪酶基因,表达在酵母表面,并确保其活性,为之后筛选其抑制剂做准备。
二、研究内容
- pPICZalpha;A-flo1p-MAGL质粒的构建
利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶构建载体
2、质粒转化到DH5alpha;大肠杆菌中
热激法
3、质粒提取
试剂盒提取法
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