乳腺癌细胞中筛选激活Nrf2/ARE通路的金雀异黄素衍生物文献综述

1. 拟研究的问题

金雀异黄素( genistein，Gen)来源于天然珍惜植物，少量存在于齿科、豆科植物中。人类的Genistein的摄取主要来源于微量的膳食异黄酮。金雀异黄素是特异性酪氨酸蛋白激酶抑制剂，是天然的靶向抗癌物质。本实验主要研究金雀异黄素衍生物的细胞毒性及其对Nrf2/ARE通路的激活作用。

1. 研究手段

1）金雀异黄素衍生物的合成

以金雀异黄素为母核，合成多取代的金雀异黄素衍生物。

2) 报告基因检测

( 1) 细胞培养及处理

乳腺癌细胞于将培养细胞置于37 ℃、体积分数5% CO2的培养箱中培养，每3 天传代1 次，细胞贴壁达到70% 时，以体积分数0. 25% 胰酶消化传代。

3）MTT

取对数生长期乳腺癌细胞，用含有体积分数10%小牛血清RPMI-1640 培养液调细胞5. 0 times; 104 /mL，接种到96孔板，每孔100 mu;L 即每孔5 000 个细胞，加入药物后终体积为150 mu;L。每组设5 个复孔，分别加入质量浓度分别为0、1、10、50、100、200mu;M 的金雀异黄素衍生物。置37 ℃、体积分数5% CO2培养箱培养48 h，取出孔板，每孔加入20 mu;LMTT（5mg/ml） 试剂，微板振荡器振荡混匀，放入培养箱中继续培养，1 h后酶标仪检测各孔吸光度A450。计算各组增殖抑制率，增殖抑制率( %) = ( 1 － A实验组/A对照组) times; 100%。

3. 参考文献：

1. 王欢，李连宏.金雀异黄素与乳腺癌相关信号通路.临床与实验病理学杂志，2013,29（3）：317-320.