组织因子TF的纯化复性研究
实验目的:1掌握蛋白质的复性研究。2掌握蛋白质纯化的方法以及所用技术。3了解组织因子的发展状况。
研究内容:包涵体是病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构。本次课题通过在菌种中培育获取组织因子tf(转运蛋白)的包涵体。而由于包涵体中的重组蛋白缺乏生物学活性,加上剧烈的处理条件,使蛋白的高级结构破坏,因此对得到的包涵体进行复性并检测。之后通过将蛋白与胶结合洗脱以及透析的手段得到纯化的蛋白并进行电泳检测。
研究手段:材料的预处理及细胞破碎采用机械破碎法,然后将其与胶结合,选择适当的缓冲液溶剂把TF提取出来,通过透析将TF进一步纯化,使用蛋白质电泳的方法检测蛋白质纯度和分子量。
主要成果形式:通过蛋白质电泳图进行展示。
主要参考文献:
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[2] 赵小凡,蒋晓娟,徐筠娉等。棉铃虫蜕皮调节转录因子在大肠杆菌中的重组表达及其包涵体纯化,昆虫学报,2004,47(3),28l一286
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[4] 杨欣,曾献武,严君喜等。重组人干扰素alpha; 2b 包涵体纯化方法的研究,中国生化药物杂志,2001,22(6),287—290
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