开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1. 拟研究和解决的问题:
肝素是从猪的肝脏组织中发现的一种酸性粘多糖,是一种天然的抗凝血活性物质,在体内外都有抗凝血的作用,如今已被广泛应用于临床,用来治疗弥漫性血管内凝血、防治血栓的形成及体外抗凝。肝素钠是体内外均能延长凝血时间的抗凝血药,从静脉注射,临床上主要应用于血栓栓塞性疾病、心脑血管手术、血液透析、心肌梗塞等治疗。肝素钠属于粘多糖类物质的钠盐,是由猪或牛的肠粘膜中提取的含有硫酸氨基的葡聚糖。近年来,研究证明肝素钠还具有降血脂的作用。但因为肝素分子结构复杂,短期内无法进行人工合成,又因在肝脏中先发现而得名肝素,现大多是从猪、牛等动物的肠粘膜或肝、肺中提取,而猪小肠来源广,其分子结构更接近人们的肝素,且提取肝素成本低,现大多数从猪小肠提取。但猪小肠中有许多种消化酶,需要除去,所以肝素钠产品需要对其中的蛋白质的含量进行测定。
本论文基于Folin-酚试剂法,设计两种蛋白含量的测定方法,证明肝素钠中蛋白含量检测方法的可行性,并比较两种方法的优缺点。Folin-酚法的原理:在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质铜络合物。此络合物将试剂磷钼酸磷钨酸(Folin试剂)还原,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此方法操作简便,灵敏度高,定量范围为5~100mu;g蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物,均有干扰作用。此方法的缺点是有蛋白质的特异性影响,即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同,标准曲线也不是严格的直线形式。
2. 采用的研究手段:
①通过阅读相关文献和书籍,了解相关问题的理论基础。参考文献主要是《美国药典》和《欧洲药典》和《中国药典》;
②通过图书馆和网络收集资料,了解国内外最新研究成果;
③对已获取的资料和信息进行分析研究,建立起两种Folin-酚法测定肝素钠中蛋白含量;
④按照两种方法做实验,通过实验得到两种方法的具体数值,再比较两种方法的到两种方法各自的优缺点。
⑤根据老师意见修改完善论文。
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