粗糙脉胞菌2489纤维二糖脱氢酶的分离与纯化文献综述

【摘要】：纤维二糖脱氢酶（CDH）是由木腐真菌产生的胞外酶，本实验以粗糙脉孢菌菌株2489产生的CDH进行研究。

CDH只在纤维素存在的条件下才会表达，而当以葡萄糖和纤维二糖为底物时，检测不到CDH活性。

粗糙脉孢菌菌株2489基因组中有两个潜在的CDH基因序列（cdh-1、cdh-2），通过在cdh-1、cdh-2基因前分别插入强启动子，使CDH能在葡萄糖或纤维二糖培养条件下表达，实验室已获得这两株工程菌。

而且，当以纤维素底物（结晶纤维或秸秆）为碳源时，CDH1的表达水平比CDH2高出至少十倍。

以葡萄糖为底物培养菌株2489-cdh1和2489-cdh2，所获得的粗酶液经超滤，硫酸铵沉淀，然后过Sephacryl-200凝胶层析和phenyl sepharose CL-4B 疏水层析，收集活力组分，通过SDS-PAGE 电泳检测得到几乎没有杂蛋白的CDH电泳条带，可见纤维二糖脱氢酶已基本纯化出来。

【关键词】：粗糙脉胞菌；纤维二糖脱氢酶；产酶表达；分离纯化1. 纤维二糖脱氢酶1.1 来源与合成纤维二糖脱氢酶是一类黄素血红素蛋白，它是一种胞外酶[1，2]，该酶主要由一些可降解木质纤维素的丝状真菌合成[3-5]。

1.2 水解作用CDH 可增强纤维素酶对纤维素的水解作用,还原木质素降解中产生的苯氧基, 且CDH 通过还原这些基团来阻止木质素的重聚合。

低浓度CDH可提高纤维素降解速率, CDH 通过氧化微晶纤维素还原端来阻止重聚合。

CDH 还可能和漆酶一起作为生物传感器的组分来检测乳糖、纤维二糖、奎宁和酚类物质[11-13]。